Pracownia Ultramikrotomowa
Pracownia Ultramikrotomowa jest częścią Laboratorium Obrazowania Trójwymiarowego Komórek i Tkanek oraz Mikroskopii Korelacyjnej.
Oferta laboratorium
-
badania histologiczne i histochemiczne
-
badania immunohistochemiczne z użyciem skrawków mrożeniowych i parafinowych
-
skanowanie preparatów histologicznych w jasnym polu i we fluorescencji
-
obrazowanie preparatów fluorescencyjnych za pomocą mikroskopu konfokalnego
-
przygotowanie próbek do badań techniką transmisyjnej i skaningowej mikroskopii elektronowej
-
badania ultrastruktury komórek i tkanek w transmisyjnym mikroskopie elektronowym
-
obrazowanie ukształtowania powierzchni obiektów biologicznych w skaningowym mikroskopie elektronowym
-
obrazowanie ultrastruktury komórek, tkanek i narządów za pomocą detektora STEM w skaningowym mikroskopie elektronowym
-
obrazowanie ultrastruktury dużych obszarów preparatu za pomocą detektora elektronów wstecznie rozproszonych w skaningowym mikroskopie elektronowym
-
obrazowanie trójwymiarowe ultrastruktury komórek i tkanek metodą „Array tomography”
-
obrazowanie trójwymiarowe ultrastruktury komórek i tkanek metodą „Serial Block Face Imaging”
-
badania cytochemiczne i immunochemiczne na poziomie mikroskopu elektronowego
-
badania z użyciem mikroskopii korelacyjnej
-
analizę morfometryczną i rekonstrukcję przestrzenną obrazów
Laboratorium Obrazowania Trójwymiarowego Komórek i Tkanek oraz Mikroskopii Korelacyjnej
- Pracownia Histochemiczna 1
- Pracownia Histochemiczna 2
- Pracownia Histochemiczna 3
- Pracownia Mikrotomowa
- Pracownia Ultramikrotomowa
- Pracownia Mikroskopii Optycznej i Elektronowej 1
- Pracownia Mikroskopii Optycznej i Elektronowej 2
- Pracownia Mikroskopii Optycznej i Elektronowej 3
- Pracownia Mikroskopii Optycznej i Elektronowej 4
Kontakt do laboratorium
Katedra Histologii i Embriologii
Wydział Medycyny Weterynaryjnej
ul. Oczapowskiego 13, 10-719 Olsztyn
tel. 089 5233 949, 089 5233 658
e-mail: histol@uwm.edu.pl
Charakterystyka aparatu
Aparat umożliwia napylanie metalami szlachetnymi nieoksydującymi (złoto, platyna, srebro, pallad, miedź, nikiel), oksydującymi (chrom, wolfram, aluminium, tytan, żelazo, kobalt, cyna, molibden, iryd, magnez, tantal) oraz węglem (plecionka węglowa lub pręty węglowe), a także ewaporację metali i węgla. Napylarka charakteryzuje się bardzo drobnym ziarnem napylonej warstwy (ziarno około 0,5 nm). Szeroka gama obrotowych stolików zapewnia równomierne pokrycie próbek przewodnikiem. Aparat posiada system monitorowania grubości napylanej warstwy (ang. Film Thickness Monitor, FTM), czyli wskazuje grubość napylonej warstwy lub automatycznie kończy proces po uzyskaniu zadanej grubości warstwy. Ponadto wyposażony jest w głowicę do plazmowego przygotowania powierzchni (konwersja hydrofobowa lub hydrofilowa). Urządzenie jest w pełni automatyczne, pozwala na programowanie pracy za pomocą ekranu dotykowego. Próżnia w komorze uzyskiwana jest za pomocą wstępnej pompy rotacyjnej i pompy turbomolekularnej.
Możliwości badawcze
Obrazowanie preparatów biologicznych w mikroskopie elektronowym skaningowym w wysokiej próżni wymaga pokrycia ich powierzchni cienką warstwą substancji przewodzącej. Napylona warstwa redukuje efekt kumulacji ładunku elektrycznego, gromadzącego się na skutek oddziaływania wiązki elektronowej na badany materiał. Napylanie zapobiega powstawaniu zakłóceń wynikających z elektryzowania się próbki i poprawia jakość uzyskiwanych obrazów. Napylarka zapewnia wysoką powtarzalność i jakość otrzymywanych powłok, a wyposażenie urządzenia w cylindry różnej wysokości oraz różne stoliki obrotowe, umożliwia napylanie szerokiej gamy próbek.

Charakterystyka aparatu
Suszarka wykorzystuje zjawisko współistnienia fazy ciekłej i gazowej w punkcie krytycznym, które umożliwia usunięcie cieczy z próbki (wysuszenie) bez jej deformacji. Proces odbywa się w pełni automatycznie, co zapewnia powtarzalność wyników, a także minimalizuje czas niezbędny do przygotowania preparatu.
Możliwości badawcze
Urządzenie pozwala na kontrolowane suszenie próbek biologicznych z zachowaniem ich naturalnej struktury. W ten sposób przygotowane próbki można pokryć warstwą przewodzącą w napylarce próżniowej, a następnie obrazować w mikroskopie skaningowym.

Charakterystyka aparatu
Urządzenie umożliwia wydajne i bezpieczne suszenie próżniowe dla rozpuszczalników niepalnych w zakresie temperatury 15 – 200 °C. Technologia APT.lineTM pozwala na bezkondensacyjne oraz homogeniczne suszenie próbek, a technologia Cross-Flow zapewnia szybką i pełną konwekcję. Suszarka wyposażona jest w panel sterujący z programowaniem odcinków czasowych oraz regulację ciśnienia.
Możliwości badawcze
Urządzenie wykorzystywane jest do odgazowania żywic używanych do zatapiania próbek, polimeryzacji żywic w warunkach podciśnienia, co eliminuje niekorzystny wpływ pary wodnej obecnej w powietrzu na jakość bloczka oraz odgazowanie wafli z naklejonymi taśmami z próbkami do badań techniką Array Tomography.

Charakterystyka aparatu
Urządzenie służy do automatycznego krojenia bloczków z użyciem noży szklanych i diamentowych. Precyzyjną manipulację zapewnia zamontowany w urządzeniu mikroskop stereoskopowy. Ultramikrotom wyposażony jest w panel sterowania z możliwością ustawienia szybkości cięcia, jak i grubości krojenia. Posiada automatyczny posuw bloczka z silnikiem krokowym, obracany blok noża w zakresie 360 stopni, regulację kąta nachylenia noża, a także układ oświetlający próbkę. Urządzenie umieszczone jest na stole antywibracyjnym, co ułatwia proces krojenia.
Możliwości badawcze
Ultramikrotom umożliwia perfekcyjne przygotowanie półcienkich (0,5 – 1 μm) i ultracienkich (50 – 80 nm) skrawków, zbieranych odpowiednio na szkiełka podstawowe lub siatki metalowe. Zbieranie skrawków odbywa się ręcznie. Dostępność różnych uchwytów pozwala na krojenie bloczków o różnorodnym kształcie i wielkości. Urządzenie umożliwia również trymowanie, czyli ograniczanie powierzchni preparatu do obrazowania.
Charakterystyka aparatu
Urządzenie wyposażone jest w precyzyjny system pozycjonowania sztabki specjalnego szkła i łamania jej na noże szklane o prostych krawędziach. Łamarka posiada czujnik nacisku oraz cyfrowy wyświetlacz umożliwiający kontrolowanie procesu i określenie momentu łamania szkła.
Możliwości badawcze
Łamarka umożliwia uzyskanie ostrych noży szklanych do trymowania bloczków z żywic syntetycznych z zastosowaniem ultramikrotomu oraz na wykonywanie preparatów półcienkich, czyli o grubości 0,5 – 1,5 μm. Ponadto nóż szklany jest preferowany do krojenia pierwszych skrawków ultracienkich, w celu ochrony krawędzi noża diamentowego przed uszkodzeniem.
Charakterystyka aparatu
Ultramikrotom jest wyposażony w unikalny system do automatycznego zbierania seryjnych skrawków ultracienkich na specjalną taśmę (metoda Array Tomography). Posiada również dodatkowy uchwyt do umieszczania skrawków na waflach krzemowych i szkiełkach. Urządzenie wyposażone jest w automatyczny posuw bloczka z silnikiem krokowym, obracany blok noża w zakresie 360 stopni, regulację kąta nachylenia noża, a także układ oświetlający próbkę diodami LED (górne, punktowe, dolne oraz przechodzące z możliwością regulacji natężenia). Ultramikrotom jest umieszczony na pneumatycznym stole antywibracyjnym oraz wyposażony w kamerę umożliwiającą kontrolowanie krojenia na monitorze komputera.
Możliwości badawcze
Ultramikrotom, oprócz tradycyjnych preparatów do badań w mikroskopie elektronowym transmisyjnym umieszczonych na siatkach metalowych, umożliwia przygotowywanie preparatów na waflach krzemowych, szkiełkach nakrywkowych oraz taśmie. W przypadku taśmy możliwe jest zebranie nawet kilku tysięcy skrawków. Preparaty przygotowane na waflach krzemowych, szkiełkach oraz taśmie przeznaczone są do obrazowania ultrastruktury komórek i tkanek w mikroskopie skaningowym. Mogą być analizowane wielokrotnie z różnymi parametrami, np. w rożnej rozdzielczości. Skrawki tego typu pozwalają na obrazowanie bardzo dużych obszarów preparatów, przygotowanie rekonstrukcji przestrzennych techniką Array Tomography oraz korelację obrazów w mikroskopie świetlnym i elektronowym. Umieszczenie skrawków bezpośrednio na waflu krzemowym zapewnia bardzo wysoką jakość i rozdzielczość obrazowania (nawet poniżej 1 nm/piksel).


